Thử nghiệm catalase

*

Bạn đang xem: Thử nghiệm catalase

Diễn đàn xét nghiệm đa khoa ›...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::...›Vi sinh Y học›Lý thuyết
*

*
Một số test xác định tính chất sinh vật hóa học của vi khuẩn gây bệnh
*

tuyenlab
*
Administrator

Xem thêm: Thứ Tự Nâng Cấp Hall 9 - Cách Nâng Cấp Quân Lính Trong Game Clash Of Clans

1. Indol test 1. nguyên lý: Vi khuẩn có enzyme tryptophanase có khả năng thủy phân acid amin tryptophan sinh indol, acid pyruvic và NH3+. Indol sinh ra sẽ kết hợp với nhóm (CHO) của p – dimetthylaminobenzaldehyd có trong thuốc thử Kovac hình thành nên phức hợp màu đỏ. 2. Thực hiện: -Vi khuẩn được cấy vào trong môi trường canh thang tryptophan, để ở 35° - 37°C trong 18 – 24h. -Nhỏ 3 – 5 giọt thuốc thử Kovac vào trong ống nghiệm. Quan sát kết quả. Phản ứng (+) sẽ xuất hiện vòng màu đỏ phía trên dung dịch nuôi cấy
*
" class="mycode_img" />
2. Test Oxidase -Phát hiện khả năng sinh enzyme cytochrom oxidase của Vi khuẩn. -Hệ thống cytochrom có ở vi khuẩn hiếu khí, hiếu kỵ khí tùy tiện. hệ thống này hoạt động như chất liên kết trong quá trình hô hấp, vận chuyển H+ → O2 tạo thành nước. -Phản ứng sử dụng thuốc thử tetramethyl p – phenylenediamine dihydrochloride. -Kỹ thuật: + Lấy 1 ăng đầy vi khuẩn hoặc dùng đũa thủy tinh lấy 1 khuẩn lạc miết trên miếng giấy đã tẩm sẵn hóa chất phản ứng và được thêm 1 giọt nước muối sinh lý. + Quan sát kết quả trong vòng 10s đầu. Phản ứng (+) cho kết quả màu xanh tím.
3. Coagulase test - Mục đích: thử nghiệm này xác định sự hiện diện của yếu tố gây đông huyết tương của vi khuẩn (coagulase). - coagulase có khả năng làm đông huyết tương người và động vật đã được chống đông. Nó hoạt động giống như thrombokinase hình thành một áo fibrinogen trong huyết tương. Có 2 loại coagulase: tự do (được tiết ra môi trường), và cố định (bám cố định vào vách tế bào) - thực hiện: + tách huyết tương thỏ từ máu đã được chống đông. + pha huyết tương với nồng độ giống nhau, được chia đều vào 3 ống + tiến hành chứng (+): nghiền khuẩn lạc của chủng chuẩn S. aureus ATCC vào 1 ống + với bệnh phẩm: chọn khuẩn lạc nghi ngờ, nhiền khuẩn lạc đó vào ống thứ 2. + với ống còn lại: chứng (-): không cho thêm gì. + để tủ ấm 35 - 37°C , đọc kết quả trong 6 - 8 h kết quả: (+) và ống chứng (+): huyết tương đông tụ lại thành khối (-) và ống chứng (-): không xuất hiện cục đông, dung dịch đồng nhất.
4. Catalase test - phát hiện enzym catalase gây xúc tác phản ứng: H2O2 → O2 + H2O - enzym này có mặt ở vi sinh vật hiếu khí, kỵ khí tùy tiện. - thực hiện: + Lấy 1 ăng vi khuẩn hoặc chọn khuẩn lạc nghi ngờ lên trên mặt 1 lam kính sạch. + Nhỏ H2O2 30%. + quan sát sau 1 - 2s: nếu có bọt khí xuất hiện --> phản ứng (+) nếu không có bọt khí xuất hiện --> phản ứng (-)